人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)的ELISA试剂盒是一种专为科学研究而设计的工具,严禁用于医学诊断。该试剂盒基于双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)原理。首先,将样品和标准品依次加入到预先包被了adropin(AD)抗体的微孔中,随后加入HRP标记的检测抗体,并进行温育和洗涤。
接下来,使用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,并在酸的作用下最终变为黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度成正相关。最后,在450nm波长下使用酶标仪测定吸光度(OD值),从而计算样品的浓度。
该试剂盒由以下组件组成:
- 微孔酶标板
- 标准品(浓度为0、25、50、100、200、400pg/mL)
- 样本稀释液
- 检测抗体-HRP
- 洗涤缓冲液
- 底物A和底物B
- 终止液
- 封板膜
- 操作说明书
组件应储存在2-8℃的环境中,且有效期为6个月。在样品收集过程中,应遵循以下步骤:
- 血清:使用不含热源和内毒素的试管,避开任何细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟,以迅速分离血清和红细胞。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,并在3000转离心30分钟后取上清。
- 细胞上清液:经过3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织与适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟收集上清。
- 保存:如未及时检测,请按一次用量分装并储存于-20℃,避免反复冻融。
在实验操作过程中,俄罗斯专享会284建议您使用高精度的加样器及枪头,并且确保每一步的加入速度不超过5分钟。如果样品浓度过高,请先用稀释液稀释后再测定。值得注意的是,封板膜仅限一次性使用,以避免交叉污染。
最后,遵循操作说明书的要求进行实验,确保试验结果的准确性。同时,底物应避光保存,所有样品和废弃物需进行适当处理。
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